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、内在性遺伝子座に挿入されると、その遺伝子が破壊されることを利用する(図1)。破壊された遺伝子は、RACE法やLAM-PCR法によって同定するが、RACE法ではおおよその位置しか特定できないのに対して、LAM-PCR法では1塩基レベルで挿入位置が特定できる(図2)。

【図1】(A)プロモータートラップ;発現している内在性遺伝子のプロモーターの下流に挿入された場合にのみレポーター遺伝子(X)が転写される。(B)ポリAトラップ;内在性遺伝子のポリA付加シグナルの前に挿入された場合のみレポーター遺伝子(X)が発現する。いずれの場合も薬剤耐性遺伝子やGFP蛍光遺伝子をレポーターとして用いることにより選択する。

【図2】(A)ポリAトラップでは、レポーター遺伝子の後にトラップした遺伝子のエクソンが繋がったキメラmRNAが作られる。それを基に3'-RACEすることにより、破壊された遺伝子を同定する。ただしベクターが挿入されたイントロンは分かるが [OKUYAMA] オクヤマ ラジエタークーリングプレート アルミ製 シビック EK4 EK9 エクセディ クラッチカバー コマツリフト FG20 FG23 FG25 FG28 FG30 用 KMC509 EXEDY いすず ISUZU クラッチ 摩耗 消耗 劣化 寿命 異音 振動 滑り クラッチ滑り 車 車用 MT ミッション ミッション車 マニュアル車 、塩基レベルでの同定は困難である。(B)LAM-PCR法ではリンカー配列とベクター配列の間で増幅した産物をシーケンスできるので Projectμ (プロジェクトミュー) BESTOP F125/R126 マークIIクオリス MCV21W 99.8~01.2 【ブレーキパッド 前後セット】H、挿入位置を1塩基レベルで特定できる。

2.レンチウイルスベクターを用いた遺伝子トラップ

我々はポリA遺伝子トラップカセットを挿入したレンチウイルスベクターを用いることでランダム遺伝子破壊したマウスを作製している。これまでに200系統を超えるマウスと1000系統近いES細胞株を樹立しており 16インチ サマータイヤ セット【適応車種:アテンザスポーツ(GH系)】WEDS ライツレー XS ブラックメタリックポリッシュ 6.5Jx16LEMANS V LM5 205/60R16、破壊遺伝子を同定すると同時にCARD理研BRCなどの公的バイオリソースセンターを通じて分与開始している。


LT-OPGシリーズ;PGKプロモーターで発現するEGFPを基に選択して作製した遺伝子破壊マウス
LT-OCGシリーズ;CAGプロモーターで発現するEGFPを基に選択して作製した遺伝子破壊マウス

詳細については直接、

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、伊川正人(メンバーリンク)までお問い合わせください。

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